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牛精液冷凍保存
時(shí)間:2020-05-26 09:50來(lái)源: 作者:班德液氮罐 點(diǎn)擊:
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牛精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理，保存在超低溫下，以達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。通常采用液氮（-196℃）和干冰（-79℃）保存。氣相液氮罐
牛精液冷凍保存的優(yōu)點(diǎn)：使用不受時(shí)間、地域以及種用雄性動(dòng)物壽命的限制。可充分提高利用率。
低溫保存細(xì)胞的原理，冷凍保護(hù)劑可以均勻充分地和細(xì)胞相接觸，保護(hù)效果好。對(duì)組織而言，保護(hù)劑只能作用于其表面，對(duì)深層細(xì)胞無(wú)法起到保護(hù)作用。為了提高組織的存活率，應(yīng)同時(shí)控制降溫的速率。控制降溫速率的慢速降溫可以使細(xì)胞外溶液中的水結(jié)冰，導(dǎo)致細(xì)胞外溶液濃度升高，胞內(nèi)水向膜外滲出，在達(dá)到一定溫度時(shí)，將組織置于灤低溫冰箱或液氮中凍存，可以減輕細(xì)胞內(nèi)結(jié)晶對(duì)細(xì)胞的損傷，保持細(xì)胞的活性。
冷凍
在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng)，距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng)，滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘，當(dāng)精液顆粒顏色變白時(shí)，立即浸入液氮，并將全部顆粒取下，收集于儲(chǔ)精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi)，并做好標(biāo)記，然后立即移入液氮罐中儲(chǔ)存。
解凍
將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升，放入干凈的小試管中，再置于40℃左右的溫水杯中，迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動(dòng)至化凍時(shí)，從水杯中取出試管，接著檢查精液活力，即為合格品。
重視保精、快速解凍與鏡檢
1、根據(jù)液氮罐的性能要求，定期添加液氮，罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。
2、取精時(shí)，盡可能用長(zhǎng)鑷子，切勿將提筒或紗布袋提到臨界線(xiàn)以上處（罐頂10厘米左右）。氣相液氮罐
3、從液氮中取出細(xì)管凍精時(shí)，要輕輕甩一兩下，將塑料細(xì)管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中，把封口端留在水外3厘米外，待管內(nèi)精液融化一半時(shí)，立即取出備用。
4、解凍后的精液鏡檢時(shí)，精子的活力不低于標(biāo)準(zhǔn)方可用于輸精，才能確保正常受精。
5、解凍后的精液應(yīng)立即輸配，不宜停放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，應(yīng)做到現(xiàn)解凍，現(xiàn)輸精。
牛精液冷凍保存的優(yōu)點(diǎn)：使用不受時(shí)間、地域以及種用雄性動(dòng)物壽命的限制。可充分提高利用率。
低溫保存細(xì)胞的原理，冷凍保護(hù)劑可以均勻充分地和細(xì)胞相接觸，保護(hù)效果好。對(duì)組織而言，保護(hù)劑只能作用于其表面，對(duì)深層細(xì)胞無(wú)法起到保護(hù)作用。為了提高組織的存活率，應(yīng)同時(shí)控制降溫的速率。控制降溫速率的慢速降溫可以使細(xì)胞外溶液中的水結(jié)冰，導(dǎo)致細(xì)胞外溶液濃度升高，胞內(nèi)水向膜外滲出，在達(dá)到一定溫度時(shí)，將組織置于灤低溫冰箱或液氮中凍存，可以減輕細(xì)胞內(nèi)結(jié)晶對(duì)細(xì)胞的損傷，保持細(xì)胞的活性。
冷凍
在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng)，距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng)，滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘，當(dāng)精液顆粒顏色變白時(shí)，立即浸入液氮，并將全部顆粒取下，收集于儲(chǔ)精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi)，并做好標(biāo)記，然后立即移入液氮罐中儲(chǔ)存。
解凍
將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升，放入干凈的小試管中，再置于40℃左右的溫水杯中，迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動(dòng)至化凍時(shí)，從水杯中取出試管，接著檢查精液活力，即為合格品。
重視保精、快速解凍與鏡檢
1、根據(jù)液氮罐的性能要求，定期添加液氮，罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。
2、取精時(shí)，盡可能用長(zhǎng)鑷子，切勿將提筒或紗布袋提到臨界線(xiàn)以上處（罐頂10厘米左右）。氣相液氮罐
3、從液氮中取出細(xì)管凍精時(shí)，要輕輕甩一兩下，將塑料細(xì)管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中，把封口端留在水外3厘米外，待管內(nèi)精液融化一半時(shí)，立即取出備用。
4、解凍后的精液鏡檢時(shí)，精子的活力不低于標(biāo)準(zhǔn)方可用于輸精，才能確保正常受精。
5、解凍后的精液應(yīng)立即輸配，不宜停放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，應(yīng)做到現(xiàn)解凍，現(xiàn)輸精。
